ish-原位杂交-武汉贝科新肽

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    2023-11-6

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在研究dna分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,ish,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成dna-dna、dna-rna或 rna-rna 双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3h、35s、32p、荧光素生物素、等非性物质)dna或rn---段作为---探针,与组织切片或细胞内待测---(rna或dna)片段进行杂交,原位杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mrna或dna 的存在并定位



fish技术的基本步骤包括探针制备、样品预处理、探针与样品的杂交、信号检测和图像分析等。在探针制备过程中,使用荧光标记物代替同位素标记物来标记探针。在样品预处理过程中,细胞或组织的固定、裂解和去除非特---蛋白质等操作都是---的,以提高探针与目标序列的亲和力和特---。在探针与样品的杂交过程中,探针与样品中的目标序列进行互补性杂交,形成可检测的荧光信号。在信号检测和图像分析过程中,使用高灵敏度荧光显微镜检测荧光信号并获取高分辨率的细胞图像。



原位杂交:

  原位杂交是指用特定探针定位、检测dna、rna的一种有效的实验方法,通过把特点序列客隆到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的rna探针,原位杂交检测,将探针和切片样品进行杂交,通过一系列显色方法,动物组织原位杂交,来确定rna或者dna表达区域;本中心原位杂交探针采用的是第高辛和生物素标记,灵敏度和同位素相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒,gish/ish/fish按照探针进行收费,每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片,收费为1万5千元,gish杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量---!





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