原位杂交:
原位杂交是指用特定探针定位、检测dna、rna的一种有效的实验方法,荧光原位杂交,通过把特点序列客隆到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的rna探针,原位杂交,将探针和切片样品进行杂交,植物原位杂交,通过一系列显色方法,来确定rna或者dna表达区域;本中心原位杂交探针采用的是第高辛和生物素标记,灵敏度和同位素相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒,gish/ish/fish按照探针进行收费,每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片,收费为1万5千元,gish杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量---!

杂交 (1) 盛有2×ssc的塑料盘同,将干烤的滤膜飘浮在液面上,浸湿5分钟。(2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放---于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。(3) 用泡过预洗液的吸水棉纸轻轻地从膜表面拭去---碎片,原位杂交技术,以降低杂交背景而不影响阳性杂交信号的强度和清晰度。(4) 将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%---胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,fish)技术是在已有的性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非性dna分子原位杂交技术。它利用荧光标记的---片段为探针,与染色体上或dna显微切片上的特异fl-n:~行杂交,通过荧光检测系统(荧光显微镜)检测信号dna序列在染色体或dna显微切片上的目的dna序列,进而确定其杂交位点。fish技术检测时间短,检测灵敏度高,无污染,已广泛应用于染色体的鉴定、基因定位和异常染色体检测等领域。

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