gamyb2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共---显微镜下进行观察,从图a 中可以看出对照gfp空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图b 中发现gamyb2-gfp 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,亚细胞定位,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。

亚细胞定位是查找生物大分子在细胞内的具体存在的位置,如在核内、胞质内或者细胞膜上存在。常见的亚细胞定位方法有生物信息学预测法、荧光法、gfp融合蛋白表达法。
荧光显微镜技术是一种非常有用的工具,可以帮助我们了解植物细胞中不同细胞器的位置和功能。通过使用不同的标记物,洋葱亚细胞定位方法,我们可以定位许多其他细胞器,例如核糖体、囊泡和细胞壁。这些信息对于研究植物细胞的生物学过程和开发新的农业技术都非常重要。
基因法转化洋葱表皮细胞:
分别用70%---和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1 μm),洋葱亚细胞定位培养,加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100 μl 放在含有1.0 cm2 洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10 μl pcambia2301-gamyb2-gfp质粒,逐步加入40 μl 0.1 mol·l-1 亚精胺和100 μl2.5 mol·l-1 cacl2,振荡混匀。基因gds-80轰击时---气罐的气压为1 300 psi,取10 μl dna 包裹好的微粒悬浮液加到基因中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用confocallaser激光共---显微镜观察。
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