亚细胞定位-武汉贝科新肽-蛋白亚细胞定位

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    2023-10-15

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武汉贝科新肽科技有限公司提供亚细胞定位-武汉贝科新肽-蛋白亚细胞定位。

用水稻原生质体进行亚细胞定位时,为什么不拍摄叶绿体的自发荧光?

经测验,使用水稻黄化苗制备原生质体,载体转化效率及基因表达强度较高,而黄化苗中叶绿体较少,因此水稻原生质体定位拍照时,除非与叶绿体共定位,否则不拍摄叶绿体的自发荧光。

为什么要提供gfp空载的对照图片?

(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。

(2)作为载体体系的参照,洋葱亚细胞定位,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。



为什么有的基因定位结果与预想的不一致?

对于一个特定的定位载体,只要荧光表达较好,其定位结果是确定的,不会随人为意愿或操作而改变。至于有时候和预想的结果不一样,可能和蛋白本身、选择的表达载体以及荧光蛋白融合方式等有关。

为什么有的普通定位结果出来后无法准确判断其定位位置?

细胞中的细胞器复杂且多样,除一些常见的、特征比较明显的细胞器外,有些细胞器在激光共---下形状比较相似,例如:线粒体、---化物酶体、高尔基体等细胞器,它们的荧光表达形状可能都是点状,因此不易区分。这时可以结合基因的其他功能研究来判断其可能表达的位置。另外,蛋白亚细胞定位,蛋白表达本身也是一个复杂的过程,涉及到多个合成场所及转运过程,自身表达情况可能比较复杂,因此不易判断具体的表达位置。



为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?

不同的预测网站有不同的计算方法,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,对于不清楚可能定位在哪里的基因,亚细胞定位,一般先做普通定位,亚细胞定位方法,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。

适用于什么实验场景?

(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。

(2)研究蛋白相互作用,与酵母双杂实验结果相互验证。



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