原位杂交公司-贝科新肽-原位杂交

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    2023-10-19

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荧光原位杂交(fish)技术具有以下优点:

可多重染色:利用不同的荧光染料标记不同的探针,可以实现多重荧光原位杂交,从而同时检测多个序列,原位杂交服务,提高实验效率了。

高度---性和性:fish技术不仅可以用于研究已知基因或序列的染色体定位,原位杂交公司,还可以用于未基因或遗传标记及染色体畸变的研究,在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。



预杂交

1)每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,原位杂交技术,避免振荡。

2)用等体积的hyb+取代hyb-。

3)60℃水浴,预杂交4小时以上。

杂交

1)吸去预杂交的hyb+,原位杂交,加上100ul已加入探针的hyb+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..

2)60℃ 温浴过夜。

 注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。



在ishh,整个实验周期是比较长的,实验程序也比较繁杂,而杂交在ishh整个实验中可被认为是“短兵相接”的一步。杂交前的一切准备工作如增加组织通透性都是为了在杂交这一步骤中---探针能进入细胞或组织与其内的靶核苷酸相结合。因此,杂交是ishh中关键的而且是重要的一个环节。杂交是将杂交液滴于切片组织上,加盖硅化的盖玻片,防止孵育过程中的高温(50℃左右)导致杂交液的蒸发。为---杂交所需的湿润环境,可将其放在盛有少量5×ssc或2×ssc(standard saline citrate, ssc)溶液的硬塑料盒中进行孵育。杂交液的成分和预杂交液基本相同,所不同的是加入了标记的---探针和---葡聚糖。



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