---原位杂交可根据其检测物而分为细胞内原位杂交和组织切片内原位杂交;根据其所用探针及所要检测---的不同又可分为dna-dna,植物原位杂交, rna-dna, rna-rna杂交。但不论哪种杂交都必须经过组织细胞的固定,预杂交,杂交,冲等一系列洗步骤及自显影或酶法显色以显示杂交结果。
我们在这儿介绍的是整胚原位杂交,不同于一般的在载片上对细胞和组织切片进行探针杂交及检测的原位杂交,
杂交 (1) 盛有2×ssc的塑料盘同,将干烤的滤膜飘浮在液面上,浸湿5分钟。(2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,原位杂交公司,放---于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。(3) 用泡过预洗液的吸水棉纸轻轻地从膜表面拭去---碎片,以降低杂交背景而不影响阳性杂交信号的强度和清晰度。(4) 将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%---胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。

原位杂交:
原位杂交是指用特定探针定位、检测dna、rna的一种有效的实验方法,通过把特点序列客隆到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的rna探针,原位杂交,将探针和切片样品进行杂交,通过一系列显色方法,来确定rna或者dna表达区域;本中心原位杂交探针采用的是第高辛和生物素标记,原位杂交服务,灵敏度和同位素相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒,gish/ish/fish按照探针进行收费,每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片,收费为1万5千元,gish杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量---!

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