杂交 (1) 盛有2×ssc的塑料盘同,原位杂交公司,将干烤的滤膜飘浮在液面上,浸湿5分钟。(2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,原位杂交,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放---于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。(3) 用泡过预洗液的吸水棉纸轻轻地从膜表面拭去---碎片,以降低杂交背景而不影响阳性杂交信号的强度和清晰度。(4) 将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%---胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,fish)技术是在已有的性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非性dna分子原位杂交技术。它利用荧光标记的---片段为探针,与染色体上或dna显微切片上的特异fl-n:~行杂交,通过荧光检测系统(荧光显微镜)检测信号dna序列在染色体或dna显微切片上的目的dna序列,进而确定其杂交位点。fish技术检测时间短,gish,检测灵敏度高,无污染,已广泛应用于染色体的鉴定、基因定位和异常染色体检测等领域。

原位杂交技术的原理是什么?有何用途
原位杂交技术的原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,将有性或非性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列要具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。

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