怎样---原位杂交实验操作时的温度?
建议仪器操作,人工操作的话要注意:
(1)对荧光原位杂交操作过程中可能使用的一些仪器进行温控检查,不符合要求的进行更换。
(2)尽可能地保持环境温度在20度以上。
(3)针对需要预热以达到要求温度的试剂,ish,在使用前必须使用温度计对其进行测温。
(4)同时检测的样本不超过4块,操作一定要迅速,实验人员要注意一些小部件的温度,尤其是在冬季。
原位杂交是一种生物学技术,它可以在细胞或组织中特定部位检测dna或rna的存在,而不需要将dna或rna分离出来。这项技术使用标记的dna或rna探针,gish,与细胞或组织中的相应dna或rna进行特---结合,然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。
原位杂交的原理很简单。dna或rna分子具有互补的核苷酸序列,因此可以通过氢键相互结合。将标记的dna或rna探针与细胞中的dna或rna进行杂交,动物组织原位杂交,可以特---地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映dna或rna在细胞中的水平和分布。

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,原位杂交,fish)是在20世纪80年代末在性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结合,杂交后再通过细胞化学过程连接上荧光染料.fish的基本原理是将dna(或rna)探针用特殊的核苷酸分子标记,然后将探针直接杂交到染色体或dna纤维切片上,再用与荧光素分子偶联的单与探针分子特---结合来检测dna序列在染色体或dna纤维切片上的定性、定位、相对定量分析.fish具有安全、快速、灵敏度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点,不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核.同时在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术.

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