gish-贝科新肽

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    2023-10-31

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武汉贝科新肽科技有限公司提供gish-贝科新肽。

菌落的裂解及dna结合于纤维素滤膜

(1) 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/l naoh的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。

(2) 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/l naoh重复步骤(1)。

(3) 吸干滤膜,gish,将滤膜转移到新的带有1mol/l tris·cl(ph7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。

(4) 吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/l nacl、0.5mol/l tris·cl (ph7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。

(5) 将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,固定dna。

(6) 将固定在膜上的dna与32 p标记的rna进行杂交。



荧光原位杂交(fish)技术具有以下优点:

高特---:荧光探针的合成是定向的,---了杂交过程的特---,可以有效地降低非特---杂交和背景干扰。

高灵敏度:荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏,可以检测出低拷贝数的dna序列,甚至可以检测单个基因序列。

快速简便:fish技术操作简便,杂交过程可以在数小时或数天内完成,而且不需要过于复杂的设备,便于在实验室开展。



同一样本可以多次做原位杂交实验吗?

一般情况下,如果操作没有得到理想的结果,是可以将探针洗涤然后进行再次的杂交的。如果使用的是直标型探针,还可以使用不同探针对同一样本进行反复杂交。针对不同的样本,处理方法略有不同。

原位杂交实操中哪些因素比较重要?

重要的因素:温度、光照、湿度和试剂的ph值。温度和湿度直接影响着探针和目标dna的杂交效率;光照影响着荧光染料的强度,所以探针要避光保存,其已经杂交的片子可用防荧光淬火剂封片且避光保存;各种试剂ph也要达到要求,这也直接关系到原位杂交的稳定性。



gish-贝科新肽由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是一家从事“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”的公司。自成立以来,我们坚持以“诚信为本,---经营”的方针,勇于参与市场的良性竞争,使“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”品牌拥有------。我们坚持“服务,用户”的原则,使贝科新肽在化学试剂中赢得了客户的---,树立了---的企业形象。 ---说明:本信息的图片和资料仅供参考,欢迎联系我们索取准确的资料,谢谢!
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