原位杂交-原位杂交检测-贝科新肽(商家)

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    2023-11-12

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原位杂交是一种---的技术,它使研究人员能够在细胞或组织中确定特定dna或rna序列的位置。这项技术在基础研究和---应用中都有广泛的应用。通过了解原位杂交的基本原理和实验步骤,研究人员可以---地理解其功能并应用于他们的研究中。



原位杂交技术的定义和基本原理原位杂交技术是一种基于---分子杂交原理,原位杂交,将标记的---探针与生物组织或细胞中的dna或rna进行特---结合,从而在细胞水平上检测目标---序列分布的技术。原位杂交技术的基本原理是利用dna或rna的互补性,通过加热或化学反应使探针与组织或细胞中的目标---序列形成双链复合物,进而实现目标---序列的定位。


原位杂交第三天

1)        用1ml含10%热灭清的mabt溶液置换溶液,原位杂交技术,放置摇床上25分钟,然后用1mlmabt置换,25分钟,再用1mlmabt溶液置换,一小时以上,后用1mlmabt溶液置换,25分钟。

2)        用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3)将胚胎转入十六孔板中,植物原位杂交,吸去staining buffer,原位杂交检测,加上300ul bm purple ap substrate(底物,用之前加5mm左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用pbst洗两三次后加上4%---固定,拍照。

6)4c冰箱保存。





原位杂交技术(in situ hybridization,ish)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位,与此同时buongiorno—nardelli和amaldi等(1970)相继利用同位素标记---探针进行了细胞或组织的基因定位,从而创造了原位杂交技术。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,---是20世纪70年代末到80年代初,分子、质粒和噬菌体dna的构建成功,为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。



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