






原位杂交杂交液
(一)杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还含有较高浓度的盐类、---胺、---葡聚糖、牛白蛋白及载体dna或rna等。
(二)杂交液中含有较高浓度的na+可使杂交率增加,可以减低探针与组织标本之间的静电结合。
(三)贾---可使杂交温度降低,所以杂交液中加入适量的---胺,可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。
(四)---葡聚糖能与水结合,从而减少杂交液的有效容积,提高探针有效浓度,以达到提高杂交率的目的。

植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面:
1. 制备组织样品:从植物中取出需要研究的组织样品,如根、茎、叶等。
2. 固定组织样品:将组织样品固定在载玻片上,通常使用或---等化学物质进行固定。
3. 处理组织样品:对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理,以便于dna探针的穿透和结合。
4. 制备dna探针:根据需要研究的基因序列,设计并合成dna探针。dna探针可以标记荧光染料或性同位素,以便于检测。
5. 杂交dna探针:将dna探针与组织样品进行杂交,通常需要在高温下进行,以便于dna探针与rna或dna结合。
6. 检测杂交信号:通过荧光显微镜或计数器等设备,检测dna探针与rna或dna的结合情况,gish,确定目标基因的表达模式和位置。

植物原位杂交在遗传育种方面的应用主要包括:
异源染色质及多种染色体畸变检测:通过远缘杂交把有用遗传物质基因的异源染色质渐渗到植物中。如带有几种抗病基因的黑麦1r染色体已被整合到许多高产的小麦品种中。原位杂交技术则是鉴定外源染色体(质)的有效手段。
基因组印记研究:基因组印记是指一个基因的两条染色体上的dna序列存在差异。通过植物原位杂交技术,可以检测到基因组印记的存在和分布,从而帮助确定基因组的进化、遗传和功能特征。
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