预杂交
1）每个管中置换成大约300ulhyb－溶液，60℃水浴5分钟，避免振荡。
2）用等体积的hyb＋取代hyb－。
3）60℃水浴，预杂交4小时以上。
杂交
1）吸去预杂交的hyb＋，加上100ul已加入探针的hyb＋溶液（探针浓度约为1ng/ul）..
2）60℃ 温浴过夜。
注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，gish，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization，fish)技术是在已有的性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非性dna分子原位杂交技术。它利用荧光标记的---片段为探针，与染色体上或dna显微切片上的特异fl-n：~行杂交，通过荧光检测系统(荧光显微镜)检测信号dna序列在染色体或dna显微切片上的目的dna序列，进而确定其杂交位点。fish技术检测时间短，检测灵敏度高，无污染，已广泛应用于染色体的鉴定、基因定位和异常染色体检测等领域。
生物领域应用原位杂交技术的例子：
物种进化与系统发生学研究：在物种进化与系统发生学研究中，原位杂交技术可以用于检测物种之间的亲缘关系和进化历程。例如，可以比较不同物种之间特定基因序列的差异，进而研究它们的亲缘关系和进化历程。
原位杂交技术在基因表达和调控、---与发育、研究和物种进化与系统发生学等领域都有广泛的应用价值，为深入探究生命现象、促进生物技术的发展提供了有力的技术支持。
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