






---原位杂交可根据其检测物而分为细胞内原位杂交和组织切片内原位杂交;根据其所用探针及所要检测---的不同又可分为dna-dna, rna-dna,荧光原位杂交, rna-rna杂交。但不论哪种杂交都必须经过组织细胞的固定,预杂交,原位杂交公司,杂交,冲等一系列洗步骤及自显影或酶法显色以显示杂交结果。
我们在这儿介绍的是整胚原位杂交,原位杂交,不同于一般的在载片上对细胞和组织切片进行探针杂交及检测的原位杂交,
荧光原位杂交(fish)技术具有以下优点:
可多重染色:利用不同的荧光染料标记不同的探针,可以实现多重荧光原位杂交,从而同时检测多个序列,提高实验效率了。
高度---性和性:fish技术不仅可以用于研究已知基因或序列的染色体定位,还可以用于未基因或遗传标记及染色体畸变的研究,在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。
fish技术的基本步骤包括探针制备、样品预处理、探针与样品的杂交、信号检测和图像分析等。在探针制备过程中,使用荧光标记物代替同位素标记物来标记探针。在样品预处理过程中,细胞或组织的固定、裂解和去除非特---蛋白质等操作都是---的,gish,以提高探针与目标序列的亲和力和特---。在探针与样品的杂交过程中,探针与样品中的目标序列进行互补性杂交,形成可检测的荧光信号。在信号检测和图像分析过程中,使用高灵敏度荧光显微镜检测荧光信号并获取高分辨率的细胞图像。

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