湖北gish-贝科新肽(商家)

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    2023-11-22

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原位杂交技术的原理是什么?有何用途

  原位杂交技术的原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,将有性或非性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列要具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。





原位杂交技术可以应用于以下场景:

组织中---dna/rna的检测和定位。例如,可以用于检测eb---mrna、人类状瘤---和巨细胞---dna等。

癌基因、抑癌基因及其他各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。

检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。

在植物基因组研究中的应用。例如,gish,通过与特定基因序列的探针进行杂交,可以在植物染色体上定位到目标基因的位置,进而构建遗传图谱,为植物育种和基因组研究提供基础数据。



同一样本可以多次做原位杂交实验吗?

一般情况下,如果操作没有得到理想的结果,是可以将探针洗涤然后进行再次的杂交的。如果使用的是直标型探针,还可以使用不同探针对同一样本进行反复杂交。针对不同的样本,处理方法略有不同。

原位杂交实操中哪些因素比较重要?

重要的因素:温度、光照、湿度和试剂的ph值。温度和湿度直接影响着探针和目标dna的杂交效率;光照影响着荧光染料的强度,所以探针要避光保存,其已经杂交的片子可用防荧光淬火剂封片且避光保存;各种试剂ph也要达到要求,这也直接关系到原位杂交的稳定性。



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