






双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,bifc)是一种用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的---技术。它利用荧光蛋白的特性,蛋白互作,将两个不同的荧光蛋白片段(通常是黄色荧光蛋白和绿色荧光蛋白)分别与两个不同的蛋白质结合,以检测它们之间的相互作用。
bifc的原理是基于荧光蛋白的特性,这些荧光蛋白可以发射出特定的光子,从而在细胞中产生荧光信号。当两个不同的荧光蛋白片段结合在一起时,它们会形成一个完整的荧光蛋白,并发出---的荧光信号。因此,通过观察荧光信号的强度和分布,我们可以推断出两个蛋白质是否相互作用以及相互作用的确切位置。

在预测阶段,研究人员会利用机器学习算法和已知的基因表达数据来训练模型,从而识别出可能与特定基因表达相关的启动子序列。这些预测的启动子序列将被用作进一步实验的基础。
在实验验证阶段,研究人员会将这些预测的启动子序列与报告基因(如荧光蛋白)一起插入植物的基因组中,然后观察报告基因的表达情况。如果报告基因的表达模式与预期相符,那么就可以认为这个启动子在促进特定基因的表达方面起着关键作用。

为什么有的共定位图片中叶绿体通道是玫红色?
在拟南芥、、玉米、大麦、小麦等材料中,种植培养苗子时是正常接受光照的,叶片中含有大量叶绿体,而叶绿素在640nm左右的激发光下可产生红色的自发荧光。当在这些含叶绿体较多的受体材料中做共定位实验时,共定位marker一般为红色荧光(在560nm左右的激发光下),实验及共---拍摄时两个波长通道的荧光互不影响,但视野下看着比较混淆,尤其叠加后二者不易分清,因此只是在颜色显示---叶绿体自发荧光设置为玫红色,以显示和共定位marker的区别。

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