原位杂交是一种生物学技术，它可以在细胞或组织中特定部位检测dna或rna的存在，而不需要将dna或rna分离出来。这项技术使用标记的dna或rna探针，与细胞或组织中的相应dna或rna进行特---结合，原位杂交试剂，然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。
原位杂交的原理很简单。dna或rna分子具有互补的核苷酸序列，因此可以通过氢键相互结合。将标记的dna或rna探针与细胞中的dna或rna进行杂交，可以特---地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映dna或rna在细胞中的水平和分布。
rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。该技术是指运用crna或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内rna表达的一种原位杂交技术。其基本原理是：在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知的rna核苷酸片段，按---杂交中碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交)，所形成的杂交体(hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mrna、rrna和trna分子。rna原位杂交技术经不断改进，ish，其应用的领域已---出dna原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析，已成为有效的分子病理学技术，动物组织原位杂交，同时在分析低丰度和罕见的mrna表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。
一. 原位杂交天
1. 重新水化和固定
1） 吸取固定好的胚胎，加入50%的pbst溶液，放置5分钟。
2） 置换成30％的pbst溶液，放置5分钟
3） 置换成pbst溶液，放置5分钟，重复一次
4） 置换成4％---的pbs溶液固定20分钟
5） 用pbst洗两次，每次放置五分钟，室温。
蛋白酶处理与后固定（本实验不做此步）
1） 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理，5体节到24小时的胚胎处理3分钟，24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶处理，发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织，以便于杂交。
2） 用pbst溶液轻洗，在pbst中放置5分钟。
3） 用4％---的pbs溶液固定20分钟，原位杂交，室温。
4） 用pbst洗两次，每次放置五分钟，室温。
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