原位杂交技术服务-武汉贝科新肽公司-原位杂交

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    2023-12-18

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把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,原位杂交,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。

用第二张保鲜膜盖住滤膜。加光片并加上增感屏于-70℃---12-16小时。

底片显---,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。




植物原位杂交的应用包括:

研究基因表达:通过观察荧光信号的位置和数量,可以确定目标基因在植物组织中的表达模式和位置。

染色体定位:将目标基因与染色体中的特定位置进行比较,可以确定目标基因在染色体中的位置和分布。

基因:通过原位杂交技术,可以确定目标基因的序列和位置,为基因提供重要的参考信息。

检测物种或品种特---:通过原位杂交技术可以检测出不同物种或品种之间基因表达的差异,从而为物种或品种特---研究提供依据。

遗传育种:通过原位杂交技术可以检测出不同品种之间基因表达的差异,从而为遗传育种提供重要的参考信息。







 组织原位杂交(tissue in situ hybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术

  原位杂交技术的基本原理

  利用---分子单链之间有互补的碱基顺序,原位杂交技术,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。

  1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成dna-dna、dna一rna或rna一rna双键分子

  2.应用带有标记的(有性同位素,如3h、35s、32p,原位杂交公司,荧光素、生物素、等非性物质)dna或rn---段作为---探针,与组织切片或细胞内待测---(rna或dna)片段进行杂交

  3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mrna或dna的存在与定位

  用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。

  此方法有---的敏感性和特---,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。




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