






原位杂交(in situ hybridazation)
固定
收集斑马鱼的胚胎,在holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%---固定,gish,在4℃保存,二十四小时后用50%2%---溶液洗,然后换成,在-20c 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用---锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)

原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强---探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应---到三个方面:保持细胞结构,限度地保持细胞内dna或rna的水平;使探针易于进入细胞或组织。dna是比较稳定的,mrna是相对稳定的但易为酶合成和降解。rna却绝然不同,非常容易被降解。因此,对于dna的定位来说,固定剂的种类和浓度并不十分重要。相反,在rna的定位上,如果要使rna的降解减少到低限度,那么,不仅固定剂的种类浓度和固定的时间十分重要,而且取材后应尽快予以冷冻或固定。

原位杂交技术在其他生物领域也有广泛的应用,例如:
植物学研究:在植物学研究中,原位杂交技术可以用于检测和定位特定基因的表达,研究基因组结构和进化。此外,还可以应用于植物染色体组型分析、基因组印记研究等方面。
微生物学研究:在微生物学领域,原位杂交技术可以用于研究---、---等微生物的基因表达和定位,以及它们在环境中的分布和相互作用。例如,通过标记特---探针,可以检测肠道微生物群落中的特定,研究其在人体健康和---发生中的作用。
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