荧光原位杂交技术-原位杂交-贝科新肽科技公司

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    2023-12-27

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原位杂交法是指将特定标记的已知顺序---为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,从而对特定---顺序进行定量定位的方法。原位杂交法可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。




---原位杂交可根据其检测物而分为细胞内原位杂交和组织切片内原位杂交;根据其所用探针及所要检测---的不同又可分为dna-dna, rna-dna, rna-rna杂交。但不论哪种杂交都必须经过组织细胞的固定,预杂交,杂交,荧光原位杂交技术,冲等一系列洗步骤及自显影或酶法显色以显示杂交结果。

我们在这儿介绍的是整胚原位杂交,原位杂交,不同于一般的在载片上对细胞和组织切片进行探针杂交及检测的原位杂交,




杂交 (1) 盛有2×ssc的塑料盘同,将干烤的滤膜飘浮在液面上,荧光原位杂交,浸湿5分钟。(2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,植物原位杂交,放---于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,防止它们粘在一起。(3) 用泡过预洗液的吸水棉纸轻轻地从膜表面拭去---碎片,以降低杂交背景而不影响阳性杂交信号的强度和清晰度。(4) 将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%---胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。




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