






原位杂交技术的技术流程
原位杂交技术的技术流程包括样本处理、探针制备、杂交反应和信号检测等步骤。样本处理包括组织或细胞的固定、包埋、切片和脱氧核糖---酶---等步骤,目的是保持组织或细胞的原始结构和---序列的完整性。探针制备包括标记探针、纯化和变性等步骤,目的是提高探针的特---和敏感性。杂交反应包括预杂交、杂交和洗脱等步骤,动物组织原位杂交,目的是使探针与目标---序列形成双链复合物。信号检测包括显色反应、荧光染色和性同位素标记等步骤,目的是可视化目标---序列的分布。
fish是原位杂交技术大家族中的一员,植物组织原位杂交,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入---诊断领域。基本原理是荧光标记的---探针在变性后与已变性的靶---在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶---进行分析。dna荧光标记探针是其中常用的一类---探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的dna进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,gish,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的---复性结合而使得组织细胞中的特------得到定位,原位杂交,并通过探针上所标记的检测系统将其在---的原有位置上显示出来。经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检dn---段或mrna进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检---的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mrna在胞质中的表达。

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