






植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面:
1. 制备组织样品:从植物中取出需要研究的组织样品,如根、茎、叶等。
2. 固定组织样品:将组织样品固定在载玻片上,原位杂交检测,通常使用或---等化学物质进行固定。
3. 处理组织样品:对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理,以便于dna探针的穿透和结合。
4. 制备dna探针:根据需要研究的基因序列,设计并合成dna探针。dna探针可以标记荧光染料或性同位素,原位杂交,以便于检测。
5. 杂交dna探针:将dna探针与组织样品进行杂交,通常需要在高温下进行,以便于dna探针与rna或dna结合。
6. 检测杂交信号:通过荧光显微镜或计数器等设备,检测dna探针与rna或dna的结合情况,确定目标基因的表达模式和位置。

细胞特---mrna转录的定位,可用于基因图谱,原位杂交技术,基因表达和基因组进化的研究;组织中---dna/rna的检测和定位,如eb---mrna、人类状瘤---和巨细胞---dna的检测;癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;基因在染色体上的定位;检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。

rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。该技术是指运用crna或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内rna表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的rna核苷酸片段,按---杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体(hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mrna、rrna和trna分子。rna原位杂交技术经不断改进,其应用的领域已---出dna原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已成为有效的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mrna表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。

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