






原位杂交是一种---的技术,它使研究人员能够在细胞或组织中确定特定dna或rna序列的位置。这项技术在基础研究和---应用中都有广泛的应用。通过了解原位杂交的基本原理和实验步骤,gish,研究人员可以---地理解其功能并应用于他们的研究中。
原位杂交技术的定义和基本原理原位杂交技术是一种基于---分子杂交原理,将标记的---探针与生物组织或细胞中的dna或rna进行特---结合,从而在细胞水平上检测目标---序列分布的技术。原位杂交技术的基本原理是利用dna或rna的互补性,通过加热或化学反应使探针与组织或细胞中的目标---序列形成双链复合物,进而实现目标---序列的定位。
预杂交
1)每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。
2)用等体积的hyb+取代hyb-。
3)60℃水浴,预杂交4小时以上。
杂交
1)吸去预杂交的hyb+,加上100ul已加入探针的hyb+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..
2)60℃ 温浴过夜。
注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。
fish是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入---诊断领域。基本原理是荧光标记的---探针在变性后与已变性的靶---在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶---进行分析。dna荧光标记探针是其中常用的一类---探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的dna进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

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