






怎样---原位杂交实验操作时的温度?
建议仪器操作,人工操作的话要注意:
(1)对荧光原位杂交操作过程中可能使用的一些仪器进行温控检查,不符合要求的进行更换。
(2)尽可能地保持环境温度在20度以上。
(3)针对需要预热以达到要求温度的试剂,在使用前必须使用温度计对其进行测温。
(4)同时检测的样本不超过4块,操作一定要迅速,实验人员要注意一些小部件的温度,动物组织原位杂交,尤其是在冬季。
dna 探针为原位杂交提供较高的灵敏度。与rna探针相比,dna探针与靶mrna 分子的杂交强度较弱,因此在杂交后的洗涤中不应使用甲醛。
探针特------。如果已知细胞中mrna或dna的确切核苷酸序列,则可据此设计高度的互补探针。如果超过 5% 的碱基对不互补,那么探针只能与靶序列发生轻度杂交。这意味着,原位杂交检测,探针更容易在洗涤和检测步骤中被洗去,可能无---确检测。
原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的---复性结合而使得组织细胞中的特------得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在---的原有位置上显示出来。经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检dn---段或mrna进行杂交,湖北原位杂交,然后显示标记物,从而分析待检---的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mrna在胞质中的表达。

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