






原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强---探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应---到三个方面:保持细胞结构,gish,限度地保持细胞内dna或rna的水平;使探针易于进入细胞或组织。dna是比较稳定的,mrna是相对稳定的但易为酶合成和降解。rna却绝然不同,非常容易被降解。因此,对于dna的定位来说,固定剂的种类和浓度并不十分重要。相反,在rna的定位上,如果要使rna的降解减少到低限度,那么,不仅固定剂的种类浓度和固定的时间十分重要,而且取材后应尽快予以冷冻或固定。

植物组织原位杂交是一种重要的分子生物学技术,它可以用来研究植物基因的表达和调控。该技术利用dna探针与目标组织中的rna或dna结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。本文将介绍植物组织原位杂交的原理、步骤和应用。
原理
植物组织原位杂交的原理是利用dna探针与目标组织中的rna或dna结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。dna探针是一段已知序列的dna分子,可以与目标rna或dna的互补序列结合。在组织原位杂交中,dna探针通常标记有荧光染料或性同位素,以便于检测。
把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。
用第二张保鲜膜盖住滤膜。加光片并加上增感屏于-70℃---12-16小时。
底片显---,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。
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