植物启动子筛选-武汉贝科新肽

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    2024-2-11

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内质网

内质网是细胞中的一个复杂网络,它负责合成和转运蛋白质。为了定位内质网,我们可以使用一种名为gfp-hdel的蛋白质来标记它们。gfp-hdel是一种带有绿色荧光的蛋白质,它可以与内质网上的hdel序列结合。在洋葱细胞中,内质网通常位于细胞的中央或周围。

 高尔基体

高尔基体是细胞中的另一个复杂网络,它负责合成和转运蛋白质。为了定位高尔基体,植物启动子筛选,我们可以使用一种名为fm4-64的化合物来标记它们。fm4-64可以穿过细胞膜并进入高尔基体,从而发出红色荧光。在洋葱细胞中高尔基体通常位于细胞的中央或周围。





洋葱亚细胞定位的步骤一般包括以下内容:取材:选取适当的新鲜洋葱材料。

固定:使用适当的固定剂对洋葱材料进行固定,以便进行后续的实验操作。

切片:将固定好的洋葱材料切成薄片,以便观察。

荧光染料标记:选取适当的荧光染料,对洋葱细胞的亚细胞结构进行标记。例如,可以用荧光染料标记叶绿体或线粒体等细胞器。

观察:使用荧光显微镜观察标记的洋葱细胞的亚细胞结构,观察各细胞器的位置和分布情况。

分析:通过图像处理软件对观察到的亚细胞结构进行定性和定量分析,例如计算各细胞器的面积、周长、形状因子等参数。

总结:根据实验观察和分析结果,得出结论,总结出洋葱细胞的亚细胞结构分布和特点。




gamyb2 在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共---显微镜下进行观察,从图a 中可以看出对照gfp空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图b 中发现gamyb2-gfp 的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。




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