湖北gish-贝科新肽(商家)

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    2024-2-13

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原位杂交(in situ hybridization)是指将特定标记的已知---序列为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,从而对特定---序列进行定量定位的过程。这个技术可以用于研究细胞或组织中特定基因或dna序列的表达和定位,从而帮助研究者深入理解和探究生物学过程。原位杂交有几种不同的类型,gish,包括荧光原位杂交和其他用于基因表达分析的方法。




将32 p标记的双链dna探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间,盛滤膜的容器应盖严,以防液体蒸发。

杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×ssc和0.1% sds溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次,同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。




原位杂交技术可以应用于以下场景:

组织中---dna/rna的检测和定位。例如,可以用于检测eb---mrna、人类状瘤---和巨细胞---dna等。

癌基因、抑癌基因及其他各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测。

检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等。

在植物基因组研究中的应用。例如,通过与特定基因序列的探针进行杂交,可以在植物染色体上定位到目标基因的位置,进而构建遗传图谱,为植物育种和基因组研究提供基础数据。




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