






原位杂交技术(in situ hybridization,ish)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位,与此同时buongiorno—nardelli和amaldi等(1970)相继利用同位素标记---探针进行了细胞或组织的基因定位,从而创造了原位杂交技术。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,---是20世纪70年代末到80年代初,分子、质粒和噬菌体dna的构建成功,为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。

和其它实验方法一样,必须同时设对照试验以证明其实验结果特---。对照试验的设置须根据---探针和靶核苷酸的种类和现有的可能条件去选定。ishh的优点是它的高度特---,它可测定组织、培养的单个细胞或细胞提取物中的核苷酸含量。应用高敏感度的性标记crna探针在理想的ishh的实验条件下检测mrna,gish,其敏感度可达到20个mrna拷贝/每个细胞。由于双链dna的稳定性,在用ishh定位dna时很少发生丢失,降解,其敏感性高到能够显示在染色体铺片上,有时甚至在组织切片上的单个基因拷贝。正因为如此,对ishh结果的解释应持慎重态度,---是前人未报告过的新发现。

原位杂交技术的实验结果
原位杂交技术的实验结果包括阳性信号和阴性信号的判断标准。阳性信号是指探针与目标---序列特---结合形成的双链复合物,在显色反应、荧光染色或性同位素标记下呈现出明显的信号。阴性信号是指探针未与目标---序列结合,不呈现任何信号。实验结果的分析需要结合探针的特---和敏感性、组织或细胞的原始结构以及实验条件等因素综合进行。
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