湖北亚细胞定位-武汉贝科新肽公司-亚细胞定位公司

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    2024-3-5

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为什么有的基因定位结果与预想的不一致?

对于一个特定的定位载体,亚细胞定位公司,只要荧光表达较好,其定位结果是确定的,湖北亚细胞定位,不会随人为意愿或操作而改变。至于有时候和预想的结果不一样,可能和蛋白本身、选择的表达载体以及荧光蛋白融合方式等有关。

为什么有的普通定位结果出来后无法准确判断其定位位置?

细胞中的细胞器复杂且多样,除一些常见的、特征比较明显的细胞器外,植物亚细胞定位,有些细胞器在激光共---下形状比较相似,例如:线粒体、---化物酶体、高尔基体等细胞器,它们的荧光表达形状可能都是点状,因此不易区分。这时可以结合基因的其他功能研究来判断其可能表达的位置。另外,蛋白表达本身也是一个复杂的过程,涉及到多个合成场所及转运过程,自身表达情况可能比较复杂,因此不易判断具体的表达位置。




除了洋葱亚细胞定位,还有许多其他亚细胞定位方法。其中,比较常见的有:

荧光法:将学方法与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。用荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等也称为荧光细胞(或组织)化学技术。

gfp融合蛋白表达法:将目的蛋白与绿色荧光蛋白(gfp)融合,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达位置。

亚细胞结构分离定位法。







gfp是绿色荧光蛋白,在扫描共---显微镜的激光照射下会发出绿色荧光,从而可以地定位蛋白质的位置。绿色萤光蛋白(gfp)是一个由约238个---酸组成的蛋白质,从蓝光到紫外线都能使其激发,发出绿色荧光。通过基因工程技术,绿色萤光蛋白(gfp)基因能转进不同物种的基因组,在后代中持续表达,并且能根据启动子特---地表达。

使用gfp必须构建融合蛋白载体,并在转染之后有效表达。这样,若在荧光显微镜下看到细胞内某一部位存在gfp信号,说明和gfp融合的蛋白也存在于该部位,这样就达到了确定某物质亚细胞定位的目的。




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