荧光原位杂交-武汉贝科新肽公司-原位杂交

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    2024-3-27

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杂交 (1) 盛有2×ssc的塑料盘同,将干烤的滤膜飘浮在液面上,原位杂交,浸湿5分钟。(2) 将滤膜转到200ml预洗液的玻璃皿中。滤膜何叠在一起,放于溶液中。用保鲜膜盖住玻璃皿,放---于培养箱内的旋转平台上。于50℃处理30分钟。在这一步及以后的所有步骤中,应缓缓摇动滤膜,荧光原位杂交,防止它们粘在一起。(3) 用泡过预洗液的吸水棉纸轻轻地从膜表面拭去---碎片,原位杂交试剂,以降低杂交背景而不影响阳性杂交信号的强度和清晰度。(4) 将滤膜转到盛有150ml预杂交液的玻璃中,在适宜温度(即在水溶液中杂交时用68℃,而在50%---胺中杂交时用42℃)下,预杂交1-2小时。





植物原位杂交的应用包括:

研究基因表达:通过观察荧光信号的位置和数量,可以确定目标基因在植物组织中的表达模式和位置。

染色体定位:将目标基因与染色体中的特定位置进行比较,原位杂交技术,可以确定目标基因在染色体中的位置和分布。

基因:通过原位杂交技术,可以确定目标基因的序列和位置,为基因提供重要的参考信息。

检测物种或品种特---:通过原位杂交技术可以检测出不同物种或品种之间基因表达的差异,从而为物种或品种特---研究提供依据。

遗传育种:通过原位杂交技术可以检测出不同品种之间基因表达的差异,从而为遗传育种提供重要的参考信息。








原位杂交技术是在一定的温度和离子浓度下,使具有特异序列的单链探针通过碱基互补规则与组织细胞内待测的---复性结合而使得组织细胞中的特------得到定位,并通过探针上所标记的检测系统将其在---的原有位置上显示出来。经特定标记的核苷酸链为探针,可与组织切片、细胞或染色体标本中的待检dn---段或mrna进行杂交,然后显示标记物,从而分析待检---的分布和含量。利用此项技术可研究各种基因在染色体上的定位,编码某种蛋白质的mrna在胞质中的表达。





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