荧光原位杂交-原位杂交-武汉贝科新肽公司

原位杂交第二天

1.

1）将探针回收，放于－20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2）加入50%---胺/2xssct溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。

3）置换2xssct1ml，60℃，放置15分钟。

4）置换0.2xssct1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。

2.

1）用mabt洗两次，原位杂交，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。

2）室温下加1ml 1：2：7溶液，时间为一小时。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，gish，4c 冰箱过夜。

fish技术的基本步骤包括探针制备、样品预处理、探针与样品的杂交、信号检测和图像分析等。在探针制备过程中，使用荧光标记物代替同位素标记物来标记探针。在样品预处理过程中，细胞或组织的固定、裂解和去除非特---蛋白质等操作都是---的，以提高探针与目标序列的亲和力和特---。在探针与样品的杂交过程中，探针与样品中的目标序列进行互补性杂交，形成可检测的荧光信号。在信号检测和图像分析过程中，使用高灵敏度荧光显微镜检测荧光信号并获取高分辨率的细胞图像。

预杂交

1）每个管中置换成大约300ulhyb－溶液，60℃水浴5分钟，避免振荡。

2）用等体积的hyb＋取代hyb－。

3）60℃水浴，预杂交4小时以上。

杂交

1）吸去预杂交的hyb＋，原位杂交技术，加上100ul已加入探针的hyb＋溶液（探针浓度约为1ng/ul）..

2）60℃ 温浴过夜。

 注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。

荧光原位杂交-原位杂交-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是从事“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供---的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：夏先生。
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