湖北gish-武汉贝科新肽公司

原位杂交第二天

1.

1）将探针回收，放于－20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2）加入50%---胺/2xssct溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。

3）置换2xssct1ml，60℃，放置15分钟。

4）置换0.2xssct1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。

2.

1）用mabt洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。

2）室温下加1ml 1：2：7溶液，时间为一小时。

3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4c 冰箱过夜。

原位杂交：

　　原位杂交是指用特定探针定位、检测dna、rna的一种有效的实验方法，通过把特点序列客隆到特殊载体上，通过转录酶反转一条天然的rna探针，将探针和切片样品进行杂交，通过一系列显色方法，来确定rna或者dna表达区域；本中心原位杂交探针采用的是第高辛和生物素标记，灵敏度和同位素相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒，gish/ish/fish按照探针进行收费，每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片，收费为1万5千元，gish杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量---！