湖北原位杂交-武汉贝科新肽科技公司-荧光原位杂交技术

荧光原位杂交（fish）技术具有以下优点：

高特---：荧光探针的合成是定向的，---了杂交过程的特---，可以有效地降低非特---杂交和背景干扰。

高灵敏度：荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏，可以检测出低拷贝数的dna序列，甚至可以检测单个基因序列。

快速简便：fish技术操作简便，杂交过程可以在数小时或数天内完成，而且不需要过于复杂的设备，荧光原位杂交技术，便于在实验室开展。

原位杂交第三天

1）        用1ml含10％热灭清的mabt溶液置换溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlmabt置换，25分钟，再用1mlmabt溶液置换，一小时以上，荧光原位杂交，后用1mlmabt溶液置换，25分钟。

2）        用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次，每次放置五分钟。

3）将胚胎转入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul bm purple ap substrate(底物，湖北原位杂交，用之前加5mm左旋米唑)，十六孔板外面包上锡箔纸以避光，避免摇动，室温下显色。

4）每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5）将显色完全的胚胎中的底物吸出，用pbst洗两三次后加上4％---固定，拍照。

6）4c冰箱保存。