






原位杂交技术(in situ hybridization,原位杂交公司,ish)是分子生物学、组织化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术,始于20世纪60年代。1969年美国耶鲁大学的gall等(1969)首先用爪蟾核糖体基因探针与其卵母细胞杂交,将该基因进行定位,与此同时buongiorno—nardelli和amaldi等(1970)相继利用同位素标记---探针进行了细胞或组织的基因定位,从而创造了原位杂交技术。自此以后,由于分子生物学技术的迅猛发展,染色体原位杂交,---是20世纪70年代末到80年代初,湖北原位杂交,分子、质粒和噬菌体dna的构建成功,为原位杂交技术的发展奠定了深厚的技术基础。

植物组织原位杂交是一种重要的分子生物学技术,它可以用来研究植物基因的表达和调控。该技术利用dna探针与目标组织中的rna或dna结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。本文将介绍植物组织原位杂交的原理、步骤和应用。
原理
植物组织原位杂交的原理是利用dna探针与目标组织中的rna或dna结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。dna探针是一段已知序列的dna分子,可以与目标rna或dna的互补序列结合。在组织原位杂交中,dna探针通常标记有荧光染料或性同位素,以便于检测。
组织原位杂交(tissue in situ hybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术
原位杂交技术的基本原理
利用---分子单链之间有互补的碱基顺序,原位杂交技术服务,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。
1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成dna-dna、dna一rna或rna一rna双键分子
2.应用带有标记的(有性同位素,如3h、35s、32p,荧光素、生物素、等非性物质)dna或rn---段作为---探针,与组织切片或细胞内待测---(rna或dna)片段进行杂交
3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mrna或dna的存在与定位
用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。
此方法有---的敏感性和特---,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。
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