






将32 p标记的双链dna探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间,盛滤膜的容器应盖严,以防液体蒸发。
杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×ssc和0.1% sds溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次,同时应避免膜干涸。
68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件,植物组织原位杂交,可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。
原位杂交技术的原理是什么?有何用途
原位杂交技术的原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,原位杂交,将有性或非性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列要具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。

预杂交
1)每个管中置换成大约300ulhyb-溶液,60℃水浴5分钟,避免振荡。
2)用等体积的hyb+取代hyb-。
3)60℃水浴,预杂交4小时以上。
杂交
1)吸去预杂交的hyb+,原位杂交公司,加上100ul已加入探针的hyb+溶液(探针浓度约为1ng/ul)..
2)60℃ 温浴过夜。
注:杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等,温度越低,探针结合越好,温度越高,背景越小。
原位杂交公司-武汉贝科新肽公司-原位杂交由武汉贝科新肽科技有限公司提供。行路致远,---。武汉贝科新肽科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的---,更矢志成为化学试剂具有竞争力的企业,与您一起飞跃,共同成功!
联系我们时请一定说明是在100招商网上看到的此信息,谢谢!
本文链接:https://tztz352388.zhaoshang100.com/zhaoshang/285786657.html
关键词: