原位杂交第三天
1） 用1ml含10％热灭清的mabt溶液置换溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlmabt置换，25分钟，再用1mlmabt溶液置换，一小时以上，后用1mlmabt溶液置换，25分钟。
2） 用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次，每次放置五分钟。
3）将胚胎转入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul bm purple ap substrate(底物，用之前加5mm左旋米唑)，十六孔板外面包上锡箔纸以避光，避免摇动，室温下显色。
4）每隔一小时观察胚胎是否开始显色
5）将显色完全的胚胎中的底物吸出，用pbst洗两三次后加上4％---固定，动物组织原位杂交，拍照。
6）4c冰箱保存。
原位杂交的基本原理是利用标记的---探针与细胞或组织中的dna或rna进行杂交，然后通过检测标记来识别探针的位置。这使得研究人员能够在细胞或组织中确定特定基因或基因组区域的位置和表达水平。
原位杂交可以用于多种类型的实验。例如，它可以用来检测特定基因在发育过程中的表达模式，或者确定特定基因变异在细胞中的分布。此外，原位杂交还可以用于诊断---，例如某些类型的，以及监测效果。
原位杂交是一种---的技术，它使研究人员能够在细胞或组织中确定特定dna或rna序列的位置。这项技术在基础研究和---应用中都有广泛的应用。通过了解原位杂交的基本原理和实验步骤，研究人员可以---地理解其功能并应用于他们的研究中。
原位杂交技术的定义和基本原理原位杂交技术是一种基于---分子杂交原理，将标记的---探针与生物组织或细胞中的dna或rna进行特---结合，从而在细胞水平上检测目标---序列分布的技术。原位杂交技术的基本原理是利用dna或rna的互补性，通过加热或化学反应使探针与组织或细胞中的目标---序列形成双链复合物，进而实现目标---序列的定位。
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