贝科新肽-动物组织原位杂交

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    2024-7-2

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fish是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入---诊断领域。基本原理是荧光标记的---探针在变性后与已变性的靶---在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶---进行分析。dna荧光标记探针是其中常用的一类---探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的dna进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。





原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的---分子为探针,在组织细胞原位检测特异---分子的技术。使含有特异序列、经过标记的---单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补---单链即靶---发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的dna或rna分子。

可以检测crna、mirna、lnrna、dna。可以各种种属的标本,包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。





荧光原位杂交(fish)技术具有以下优点:

高特---:荧光探针的合成是定向的,---了杂交过程的特---,可以有效地降低非特---杂交和背景干扰。

高灵敏度:荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏,可以检测出低拷贝数的dna序列,动物组织原位杂交,甚至可以检测单个基因序列。

快速简便:fish技术操作简便,杂交过程可以在数小时或数天内完成,而且不需要过于复杂的设备,便于在实验室开展。





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