






原位杂交第二天
1.
1)将探针回收,放于-20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。
2)加入50%---胺/2xssct溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。
3)置换2xssct1ml,60℃,放置15分钟。
4)置换0.2xssct1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。
2.
1)用mabt洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。
2)室温下加1ml 1:2:7溶液,荧光原位杂交,时间为一小时。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4c 冰箱过夜。
植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面:
1. 制备组织样品:从植物中取出需要研究的组织样品,如根、茎、叶等。
2. 固定组织样品:将组织样品固定在载玻片上,通常使用或---等化学物质进行固定。
3. 处理组织样品:对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理,以便于dna探针的穿透和结合。
4. 制备dna探针:根据需要研究的基因序列,设计并合成dna探针。dna探针可以标记荧光染料或性同位素,以便于检测。
5. 杂交dna探针:将dna探针与组织样品进行杂交,通常需要在高温下进行,以便于dna探针与rna或dna结合。
6. 检测杂交信号:通过荧光显微镜或计数器等设备,检测dna探针与rna或dna的结合情况,确定目标基因的表达模式和位置。

原位杂交法是指将特定标记的已知顺序---为探针与细胞或组织切片中---进行杂交,从而对特定---顺序进行定量定位的方法。原位杂交法可以在细胞标本或组织标本上进行。另有荧光原位杂交使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。

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