






菌落的裂解及dna结合于纤维素滤膜
(1) 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/l naoh的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,湖北原位杂交,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。
(2) 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/l naoh重复步骤(1)。
(3) 吸干滤膜,将滤膜转移到新的带有1mol/l tris·cl(ph7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。
(4) 吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/l nacl、0.5mol/l tris·cl (ph7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。
(5) 将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,原位杂交技术咨询,固定dna。
(6) 将固定在膜上的dna与32 p标记的rna进行杂交。
原位杂交(in situ hybridazation)
固定
收集斑马鱼的胚胎,在holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%---固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%---溶液洗,原位杂交服务,然后换成,在-20c 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用---锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)

原位杂交技术还在以下生物领域有应用:
细胞化学和学:原位杂交技术可以用于研究细胞内特定化学物质的定位和分布,例如检测细胞内酶、、神经递质等物质的分布和定位。此外,还可以应用于学研究,例如检测细胞、分子的分布和定位等。
神经科学:在神经科学领域,原位杂交技术常被用于研究神经元的生长、发育和连接等过程。例如,荧光原位杂交技术,通过标记特定基因的探针,可以检测神经元中特定基因的表达和定位,进而研究其在神经信号传递、神经环路形成等方面的作用。
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