武汉贝科新肽-植物染色体原位杂交-原位杂交

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    2024-7-27

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荧光原位杂交(fish)技术具有以下优点:

高特---:荧光探针的合成是定向的,---了杂交过程的特---,可以有效地降低非特---杂交和背景干扰。

高灵敏度:荧光信号的检测比性信号的检测更灵敏,植物染色体原位杂交,可以检测出低拷贝数的dna序列,原位杂交,甚至可以检测单个基因序列。

快速简便:fish技术操作简便,杂交过程可以在数小时或数天内完成,而且不需要过于复杂的设备,原位杂交检测,便于在实验室开展。





植物原位杂交在遗传育种方面的应用主要包括:

检测物种或品种特---:通过植物原位杂交技术可以检测出不同物种或品种之间基因表达的差异,从而为物种或品种特---研究提供依据。

遗传育种:通过植物原位杂交技术可以检测到不同品种之间基因表达的差异,从而为遗传育种提供重要的参考信息。例如,通过将特定的外源基因导入到植物细胞中,然后利用原位杂交技术检测该基因在植物细胞中的位置和表达情况,为遗传育种提供重要的参考信息。





将32 p标记的双链dna探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间,盛滤膜的容器应盖严,以防液体蒸发。

杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×ssc和0.1% sds溶液中,轻轻振摇5分钟,gish,并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次,同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。





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