湖北植物组织原位杂交-贝科新肽(商家)

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    2024-8-5

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原位杂交第二天

1.

1)将探针回收,放于-20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2)加入50%---胺/2xssct溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。

3)置换2xssct1ml,60℃,放置15分钟。

4)置换0.2xssct1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。

2.

1)用mabt洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。

2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4c 冰箱过夜。







原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的---分子为探针,在组织细胞原位检测特异---分子的技术。使含有特异序列、经过标记的---单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补---单链即靶---发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的dna或rna分子。

可以检测crna、mirna、lnrna、dna。可以各种种属的标本,包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。





生物领域应用原位杂交技术的例子:

基因表达和调控研究:原位杂交技术可以用于研究基因表达的调控机制。例如,可以标记特定基因的探针,植物组织原位杂交,检测该基因在不同环境、不同生长条件下的表达情况,进而研究其表达调控机制。

---与发育研究:在---与发育研究中,原位杂交技术常被用于检测和定位特定基因的表达情况,进而了解---的过程和机制。例如,可以标记与---相关的基因探针,检测该基因在不同组织、不同发育阶段的表达情况。







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