原位杂交-武汉贝科新肽-原位杂交技术服务

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原位杂交技术方法大致可分为:1.杂交前准备,包括固定、取材、玻片和组织的处理,如何增强---探针的穿透性、减低背景染色等;2.杂交;3.杂交后处理;4.显示(visualization):包括性自显影和非性标记的显色。固定原位杂交组织化学技术在固定剂的应用和选择上应---到三个方面:保持细胞结构,限度地保持细胞内dna或rna的水平;使探针易于进入细胞或组织。dna是比较稳定的,mrna是相对稳定的但易为酶合成和降解。rna却绝然不同,非常容易被降解。因此,对于dna的定位来说,固定剂的种类和浓度并不十分重要。相反,在rna的定位上,植物原位杂交,如果要使rna的降解减少到低限度,那么,不仅固定剂的种类浓度和固定的时间十分重要,而且取材后应尽快予以冷冻或固定。





植物组织原位杂交是一种重要的分子生物学技术,它可以用来研究植物基因的表达和调控。该技术利用dna探针与目标组织中的rna或dna结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。本文将介绍植物组织原位杂交的原理、步骤和应用。

原理

植物组织原位杂交的原理是利用dna探针与目标组织中的rna或dna结合,原位杂交技术服务,从而确定目标基因的表达模式和位置。dna探针是一段已知序列的dna分子,可以与目标rna或dna的互补序列结合。在组织原位杂交中,原位杂交,dna探针通常标记有荧光染料或性同位素,以便于检测。





原位杂交第二天

1.

1)将探针回收,放于-20c保存(通常探针可重复使用十次左右)。

2)加入50%---胺/2xssct溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。

3)置换2xssct1ml,60℃,放置15分钟。

4)置换0.2xssct1ml,60℃,原位杂交公司,放置30分钟,重复一次。

2.

1)用mabt洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。

2)室温下加1ml 1:2:7溶液,时间为一小时。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4c 冰箱过夜。







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