武汉贝科新肽-双分子荧光互补技术

洋葱亚细胞定位的步骤一般包括以下内容：取材：选取适当的新鲜洋葱材料。

固定：使用适当的固定剂对洋葱材料进行固定，以便进行后续的实验操作。

切片：将固定好的洋葱材料切成薄片，以便观察。

荧光染料标记：选取适当的荧光染料，对洋葱细胞的亚细胞结构进行标记。例如，可以用荧光染料标记叶绿体或线粒体等细胞器。

观察：使用荧光显微镜观察标记的洋葱细胞的亚细胞结构，观察各细胞器的位置和分布情况。

分析：通过图像处理软件对观察到的亚细胞结构进行定性和定量分析，例如计算各细胞器的面积、周长、形状因子等参数。

总结：根据实验观察和分析结果，得出结论，总结出洋葱细胞的亚细胞结构分布和特点。

用水稻原生质体进行亚细胞定位时，为什么不拍摄叶绿体的自发荧光？

经测验，使用水稻黄化苗制备原生质体，载体转化效率及基因表达强度较高，而黄化苗中叶绿体较少，因此水稻原生质体定位拍照时，除非与叶绿体共定位，否则不拍摄叶绿体的自发荧光。

为什么要提供gfp空载的对照图片？

（1）作为整个实验过程中的操作参照，可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。

（2）作为载体体系的参照，确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。