gish-武汉贝科新肽公司

植物组织原位杂交的步骤包括以下几个方面：

1. 制备组织样品：从植物中取出需要研究的组织样品，如根、茎、叶等。

2. 固定组织样品：将组织样品固定在载玻片上，gish，通常使用或---等化学物质进行固定。

3. 处理组织样品：对固定的组织样品进行脱水、透明化、脱脂等处理，以便于dna探针的穿透和结合。

4. 制备dna探针：根据需要研究的基因序列，设计并合成dna探针。dna探针可以标记荧光染料或性同位素，以便于检测。

5. 杂交dna探针：将dna探针与组织样品进行杂交，通常需要在高温下进行，以便于dna探针与rna或dna结合。

6. 检测杂交信号：通过荧光显微镜或计数器等设备，检测dna探针与rna或dna的结合情况，确定目标基因的表达模式和位置。

原位杂交第三天

1）        用1ml含10％热灭清的mabt溶液置换溶液，放置摇床上25分钟，然后用1mlmabt置换，25分钟，再用1mlmabt溶液置换，一小时以上，后用1mlmabt溶液置换，25分钟。

2）        用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次，每次放置五分钟。

3）将胚胎转入十六孔板中，吸去staining buffer，加上300ul bm purple ap substrate(底物，用之前加5mm左旋米唑)，十六孔板外面包上锡箔纸以避光，避免摇动，室温下显色。

4）每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5）将显色完全的胚胎中的底物吸出，用pbst洗两三次后加上4％---固定，拍照。

6）4c冰箱保存。