荧光原位杂交-湖北原位杂交-贝科新肽

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    2023-11-15

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fish是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,湖北原位杂交,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入---诊断领域。基本原理是荧光标记的---探针在变性后与已变性的靶---在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶---进行分析。dna荧光标记探针是其中常用的一类---探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的dna进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,荧光原位杂交,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。



原位杂交是一种生物学技术,它可以在细胞或组织中特定部位检测dna或rna的存在,而不需要将dna或rna分离出来。这项技术使用标记的dna或rna探针,与细胞或组织中的相应dna或rna进行特---结合,然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。

原位杂交的原理很简单。dna或rna分子具有互补的核苷酸序列,因此可以通过氢键相互结合。将标记的dna或rna探针与细胞中的dna或rna进行杂交,可以特---地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映dna或rna在细胞中的水平和分布。





 组织原位杂交(tissue in situ hybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术

  原位杂交技术的基本原理

  利用---分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。

  1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成dna-dna、dna一rna或rna一rna双键分子

  2.应用带有标记的(有性同位素,原位杂交技术,如3h、35s、32p,荧光素、生物素、等非性物质)dna或rn---段作为---探针,原位杂交服务,与组织切片或细胞内待测---(rna或dna)片段进行杂交

  3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mrna或dna的存在与定位

  用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。

  此方法有---的敏感性和特---,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。



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