






同一样本可以多次做原位杂交实验吗?
一般情况下,如果操作没有得到理想的结果,荧光原位杂交,是可以将探针洗涤然后进行再次的杂交的。如果使用的是直标型探针,还可以使用不同探针对同一样本进行反复杂交。针对不同的样本,植物原位杂交,处理方法略有不同。
原位杂交实操中哪些因素比较重要?
重要的因素:温度、光照、湿度和试剂的ph值。温度和湿度直接影响着探针和目标dna的杂交效率;光照影响着荧光染料的强度,所以探针要避光保存,其已经杂交的片子可用防荧光淬火剂封片且避光保存;各种试剂ph也要达到要求,这也直接关系到原位杂交的稳定性。
原位杂交:
原位杂交是指用特定探针定位、检测dna、rna的一种有效的实验方法,通过把特点序列客隆到特殊载体上,通过转录酶反转一条天然的rna探针,将探针和切片样品进行杂交,通过一系列显色方法,来确定rna或者dna表达区域;本中心原位杂交探针采用的是第高辛和生物素标记,灵敏度和同位素相当。 我们采用roche标记及显色试剂盒,gish/ish/fish按照探针进行收费,荧光原位杂交技术,每个试剂盒每条探针可以杂交60-80张玻片,收费为1万5千元,gish杂交因需要加抗淬灭剂每条探针收费为1万9千元。量---!

细胞特---mrna转录的定位,湖北原位杂交,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;组织中---dna/rna的检测和定位,如eb---mrna、人类状瘤---和巨细胞---dna的检测;癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;基因在染色体上的定位;检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些的诊断和生物学剂量测定等。

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