动物组织原位杂交-湖北原位杂交-贝科新肽科技公司

原位杂交（in situ hybridazation）

固定

收集斑马鱼的胚胎，在holfretor水中培养，到达所需要的发育时期时，用蛋白酶去除卵膜，用4%---固定，在4℃保存，二十四小时后用50%2%---溶液洗，动物组织原位杂交，然后换成，湖北原位杂交，在-20c 保存，待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理，去除色素。或者使用---锍脲稀溶液培养，可阻断色素的形成)

预杂交

1）每个管中置换成大约300ulhyb－溶液，60℃水浴5分钟，避免振荡。

2）用等体积的hyb＋取代hyb－。

3）60℃水浴，预杂交4小时以上。

杂交

1）吸去预杂交的hyb＋，加上100ul已加入探针的hyb＋溶液（探针浓度约为1ng/ul）..

2）60℃ 温浴过夜。

 注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。