






原位杂交技术(in situhybridization)是以标记的---分子为探针,gish,在组织细胞原位检测特异---分子的技术。使含有特异序列、经过标记的---单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补---单链即靶---发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的dna或rna分子。
可以检测crna、mirna、lnrna、dna。可以各种种属的标本,包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。
原位杂交是一种生物学技术,它可以在细胞或组织中特定部位检测dna或rna的存在,而不需要将dna或rna分离出来。这项技术使用标记的dna或rna探针,与细胞或组织中的相应dna或rna进行特---结合,然后通过光学显微镜或电子显微镜观察探针的位置和数量。
原位杂交的原理很简单。dna或rna分子具有互补的核苷酸序列,因此可以通过氢键相互结合。将标记的dna或rna探针与细胞中的dna或rna进行杂交,可以特---地检测这些探针的位置和数量。探针的数量和位置可以反映dna或rna在细胞中的水平和分布。

组织原位杂交(tissue in situ hybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术
原位杂交技术的基本原理
利用---分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,形成杂交的双链。
1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成dna-dna、dna一rna或rna一rna双键分子
2.应用带有标记的(有性同位素,如3h、35s、32p,荧光素、生物素、等非性物质)dna或rn---段作为---探针,与组织切片或细胞内待测---(rna或dna)片段进行杂交
3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mrna或dna的存在与定位
用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。
此方法有---的敏感性和特---,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。
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